Давайте попробуем сделать количественный ЯМР

В предыдущих семи выпусках мы представили обзор, в том числе основы количественного ЯМР. В этом выпуске мы представим практическое содержание.

Подготовка к работе.

Прежде чем приступить к количественным измерениям ЯМР, необходимо заранее провести некоторые приготовления. К ним относятся (1) выбор метода количественного измерения (метод внутреннего стандарта или метод внешнего стандарта), (2) определение условий подготовки пробы (выбор растворителя и эталонного стандарта для qNMR, стабильности раствора пробы) и (3) подтверждение того, что сигналы, пригодные для количественного определения, появляются на ¹Спектр H-ЯМР. Здесь мы кратко представим выбор метода количественного измерения.
Для метода внутреннего стандарта эталонный стандарт для qNMR готовят в том же растворе, что и аналит. Для метода внешнего стандарта эталонный стандарт для qNMR и аналиты готовятся отдельно. При принятии решения о том, какой метод выбрать, следует учитывать, имеет ли более высокий приоритет точность или восстановление образца. Если вы хотите подчеркнуть точность, рекомендуется использовать метод внутреннего стандарта. С другой стороны, если анализируется драгоценный материал, представляющий собой отдельное изолированное вещество, метод внешнего стандарта, вероятно, будет лучше.

Рис.2 Метод внутреннего стандарта и внешнего стандарта

Аналитическая схема количественного ЯМР

Количественный ЯМР с использованием метода внутреннего стандарта или метода внешнего стандарта состоит из трех этапов:
Подготовка проб → Измерение ЯМР → Анализ.

Рис.1 Блок-схема анализа qNMR

1) Метод внутреннего стандарта (рис.3. Процедура метода внутреннего стандарта)

Подготовка проб: убедитесь в точности используемых весов, точно взвесьте эталонный стандарт для qNMR и аналит. Рекомендуется создать 3 образца из одной партии.
Измерение ЯМР: выполните измерение 1H в оптимизированных условиях для количественного определения. Одним из параметров, на который следует обратить внимание, является настройка времени повторения импульсов. Установите достаточно продолжительное время повторения, исходя из Т1 (время продольной релаксации). Мы рекомендуем вам выполнить три измерения на каждом образце qNMR.
Анализ: при обработке FID некоторая обработка может выполняться автоматически, но рекомендуется проверять ее визуальным осмотром.

Рис.3 Процедура для метода внутреннего стандарта

2) Метод внешнего стандарта (рис. 4. Процедура метода внешнего стандарта)

Подготовка проб: Подтвердите точность используемых весов, точно взвесьте эталонный стандарт для qNMR и аналит отдельно. В этом случае важно знать точную молярную концентрацию эталонного стандарта для количественного определения.
Измерение ЯМР: Измерение проводится в количественных условиях, но необходима калибровка, такая как измерение температуры и ширины импульса, для сравнения спектра эталонного раствора и спектра раствора аналитического образца.
Анализ: Как и в случае с методом внутреннего стандарта, необходим визуальный осмотр после обработки. При расчете, в зависимости от параметров измерения каждого образца qNMR, расчеты должны включать калибровочные коэффициенты.

Рис.4 Процедура для метода внешнего стандарта