Изучение биологических образцов в режиме 3D Помимо классической электронной томографии

Развитие методов электронной томографии имеет большое значение для раскрытия трехмерной организации и внутренней детализации объектов нанометрового масштаба. Здесь мы описываем два недавно разработанных подхода, позволяющих превзойти некоторые вехи современной электронной томографии: низкое отношение сигнала к шуму томограмм и обнаружение химических элементов в 3D. Применяемые методы опираются на томографию STEM и томографию EFTEM, возможности электронного микроскопа JEOL JEM-200FS на 2200 кВ, оснащенного встроенным энергетическим фильтром и STEM-детекторами. В протестированных образцах, залитых смолой, томография STEM-HAADF была успешно применена для улучшения соотношения сигнал-шум и определения структур цитоскелета на клетках почек млекопитающих (LLC-PK1). Для обнаружения элементов томография EFTEM показала точное местоположение и трехмерное расположение частиц железа, связанных с клеточной стенкой патогенного гриба Fonsecaea pedrosoi. Оба метода привели к достаточно четким наборам данных для прямой интерпретации и сегментации на основе пороговых значений.