Структурный анализ небольшой молекулы с использованием JMS-S3000 «SpiralTOF™-plus 2.0» ー MS/MS-измерение продукта фотодеградации резерпина ー [Приложение MALDI]

MALDI-TOFMS с высоким разрешением по массе может определять элементный состав целевых соединений по их измеренным точным массам. Измерение МС/МС эффективно для выяснения химической структуры, которую трудно вывести из точной информации о массе. Измерение МС/МС с использованием JMS-S3000 "SpiralTOF™-plus 2.0" с опцией TOF-TOF может обнаруживать осколочные ионы, образующиеся в результате высокоэнергетической диссоциации, вызванной столкновением (HE-CID). HE-CID - это метод фрагментации ионов-предшественников за счет одного столкновения. Известно, что он дает больше структурной информации, чем низкоэнергетическая диссоциация, вызванная столкновениями, которая фрагментирует ионы-предшественники в результате множественных столкновений. С другой стороны, поскольку MALDI-TOFMS трудно соединить в режиме онлайн с методами предварительного разделения, такими как жидкостная хроматография, целевые соединения необходимо разделять только по их массам. Для получения точной структурной информации для компонентов, близких по массе, требуется высокая селективность по ионам-предшественникам. SpiralTOF™-plus 2.0 с опцией TOF-TOF позволяет достичь высокой селективности в отношении ионов прекурсоров благодаря длинной траектории полета спиральной ионной оптики, используемой в 1^st ТОФМС. В этом примечании по применению мы сообщаем о выяснении структуры продукта фотодеградации резерпина в качестве примера структурного анализа компонента, близкого к возможной интерференции по массе, путем измерения МС/МС с использованием SpiralTOF™-plus 2.0 с опцией TOF-TOF.

Условия измерения

Раствор резерпина подвергали воздействию солнечных лучей в помещении в течение нескольких дней. Метод приготовления образцов и условия измерения представлены в таблице 1. Смесь образцов и растворов матрицы наносили на мишень и сушили на воздухе. Измерения МС и МС/МС проводили на одном и том же участке образца.

Таблица 1. Подготовка проб и условия измерения

Итоги

На рис. 1 представлены результаты измерений в спиральном режиме. Протонированные молекулы [M+H]⁺ резерпина и продуктов его фотодеградации. м / г 609 и м / г 607, которые находятся на расстоянии 2 u друг от друга соответственно. Измерения МС/МС проводились для м / г 607 и м / г 609, и были получены масс-спектры ионов-продуктов, показанные на рисунках 2а и 3а. На⁺ или К⁺ не присутствовали в обоих масс-спектрах ионов-продуктов, подтверждая, что ионы-предшественники были [M + H]⁺. Применение информации об аддуктивных ионах к условиям оценки элементного состава, м / г 609 и 607 соответствовали резерпину и дегидрированному резерпину соответственно (рис. 2b и 3b). Кроме того, предполагалось, что положение двойной связи в продукте фотодеградации резерпина находится в гетероциклической части (рис. 2в и 3в).

Рисунок 1. Масс-спектр резерпина и его фотодеградированного соединения (спиральный режим).

Рис. 2. Масс-спектр ионов-продуктов резерпина (а). Предполагаемый элементный состав иона (б) и предполагаемые каналы фрагментации (в).

Рис. 3. Масс-спектр ионов продуктов фотодеградации резерпина (а). Предполагаемый элементный состав иона (б) и предполагаемые каналы фрагментации (в).

Заключение

SpiralTOF™-plus2.0 с опцией TOF-TOF обладает высокой селективностью по ионам-предшественникам, так что масс-спектры ионов-продуктов резерпина и продуктов его фотодеградации, отличающиеся всего на 2 u, были получены отдельно. Ионы аддуктов можно идентифицировать по масс-спектрам ионов-продуктов, и, таким образом, можно было сузить список кандидатов элементного состава. Полученные масс-спектры ионов-продуктов значительно различались между ними, и их химическую структуру можно понять из уникальных масс-спектров ионов-продуктов.